动物模型构建平台

肝硬化动物模型

选体重150-200g的Wistar大鼠，将D-氨基半乳糖配制成10％的生理盐水溶液，用1NNaOH将pH调节至7.0,以250mg/kg的剂量行腹内注射，每天一次，每周６天，约半年左右即可形成肝硬化。
 
  在复制过程中，自股动脉取血作肝功能试验，包括血清蛋白测定、浊度试验、转氨酶、乳酸脱氢酶（LDH）、单胺氧化酶(MAO)、５'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰转肽酶(γ－GT)及胆硷酯酶。分批处死动物进行尸解，观察腹水，心、肝、脾、肺肾等器官形态,用4％甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片厚5微米,进行HE染色、网状纤维（Gordon与Sweet法)、胶原纤维（Van Gieson 法)及弹力纤维(Weiger法)染色。

   在采用上述剂量D-氨基半乳糖长期多次注入大鼠腹腔时，动物耐受性较好。逐渐出现进食活动减少，有时解稀糖大便，腹部较为膨隆。半年内与对照组相比，实验组体重平均增长显著延缓。
 
  尸检时可见腹腔内有腹水，0-20ml不等。心、脾、肺、肾、无明显改变。与对照组相比，早期肝明显增大、重量增加，色泽较灰黄，以后体积逐渐缩小，质地变硬，边缘较钝，肝表面可见弥漫性分布的细颗粒状结节，结节大小不一，直径约为0.5-1.5mm,结节间可见弥漫分布的纤维间隔，间隔一般较细小，其凹凸程度随病变而加深。切片HE染色、光镜下检查，在注射氨基半乳糖5个月后，肝小叶结构开始紊乱,形成大小不等的肝细胞团，有的仍见好的中央静脉，但其周围门脉区胆管上皮高度增生，其间夹有残留的个别肝细胞及少量单核多核白细胞及褐色素沉着。随着病程的延长，增生的胆管及纤维母细胞向四周呈星芒状伸展，有的与中央静脉相连。一般肝细胞变性坏死少见，大多呈增生表现。Gordon与Sweet 法染色显示肝细胞团中网状纤维少见而周围组织中存在着大量疏松的网状纤维。胶原纤维及弹性纤维均未见增多。除肝外，其余实质器官切片无异常发现。
 
 实验动物模型在出现肝硬化时血清白蛋白含量稍有降低,浊度试验略增高,血清GPT、LDH、MAO、5'-NA、γ-GT与胆硷脂酶均无明显改变。