江苏省南京市栖霞区和燕路371号 东南大学国家大学科技园科创楼A301
agomir是一种用于微RNA功能研究的化学修饰的双链微RNA模拟物,它可以模仿内源性的成熟微RNA,与靶基因mRNA结合,从而调节其表达。agomir与普通的微RNA模拟物相比,具有更高的稳定性和活性,更易通过细胞膜和组织间隙,富集于靶细胞。因此,agomir可以用于体内实验,通过注射、吸入或喂食等方式给予动物,观察微RNA对生理和病理过程的影响。
agomir的合成需要对微RNA模拟物进行特殊的化学修饰,包括在反义链上加入2个硫代磷酸酯键(phosphorothioate)在5′端,4个硫代磷酸酯键在3′端,以及3′端加入胆固醇(cholesterol)基团,同时对全长核苷酸进行2′-甲氧基(2′-methoxy)修饰。这些修饰可以提高agomir的稳定性,防止被核酸酶降解,增强其与细胞膜的亲和力,促进其进入细胞。
agomir的使用需要注意以下几点:
• agomir的设计需要参考miRBase数据库中的微RNA序列,选择合适的靶基因和靶组织。
• agomir的剂量和给药方式需要根据实验目的和动物模型进行优化,一般建议从低剂量开始逐步增加,观察效果和副作用。
• agomir的效果持续时间一般为1周以上,甚至可达5-6周,因此需要合理安排实验时间点和取样方式。
• agomir的使用需要配合相应的负对照(negative control),即没有靶基因结合位点的随机序列修饰物,以排除非特异性效应。
• agomir的使用需要结合其他方法进行验证,如RT-qPCR、Western blot、免疫组化等,以评估微RNA和靶基因表达水平的变化。