江苏省南京市栖霞区和燕路371号 东南大学国家大学科技园科创楼A301
(1)复制方法 体重为280~320g雄性Wistar大鼠,按35mg/kg体重的剂量腹腔注射3%的戊巴比妥钠麻醉。动物仰卧固定分离右股动脉,并用动脉夹于股动脉中段阻断血液。然后注入月桂酸,注入的总体积为0.2ml。首先在动脉夹的下方1.0cm处近心端方向注入月桂酸,然后再向股动脉远心端方向注入余下的月桂酸。注入的标准为血管明显充盈,略显白色而无明显肿胀时,注入结束时注射器的取出动作要轻柔。注入月桂酸15min后打开动脉夹,复通血流,并观察出血和止血情况。待动物完全止血、手术侧肢体出现明显改变后可将各层组织逐层缝合。大鼠股动脉注入月桂酸后约5min,患侧足爪部皮肤温度降低,皮肤颜色变苍白继而变青紫,动脉搏动减弱或消失,次日受累的足跖变黑,并逐渐向上发展,形成坏疽和木乃伊化。少数动物术后表现为患肢水肿,糜烂及炎症反应。所有大鼠手术后均有患肢疼痛、跛行和曳行现象,2周内大鼠出现患肢坏疽部分脱落,脱落率为90%。病理检查发现,大鼠患肢动脉内均有不同程度的血栓形成,动脉内皮出现不同程度的增生,中膜与外膜还出现了明显的炎细胞浸润。该模型的评价分为整体评价以及病理学评价:整体评价主要对患肢肿胀程度、坏疽和木乃伊化病变程度以及范围进行分级评定(0级:正常;1级:病变局限于趾甲部;2级:病变局限于趾部;3级:病变局限于足爪部;4级:病变局限于膝关节以下;5级:病变局限于膝关节以上);在病理评价方面,将模型致残大鼠整个右下肢取下后用10%的甲醛固定,3d后再用10%的硝酸脱钙。将足趾、踝关节上、下及股部4个部位进行横断切片,HE染色,每个标本分别取4张四部位切片放在一个病理切片上,然后在显微镜下对动脉血栓情况进行分级(0级:无血栓;1级:1个血栓;2级:2~3个血栓;4级:4个以上血栓),同时分别对动脉壁炎性细胞浸润、纤维增生及血栓肌化与再通等情况进行观察。
股动脉注射月硅酸钠1W后出现后肢坏死 ,病理HE染色和彩超,股动脉血管壁增厚,血流速度降低(可能与下肢坏死有关)
(2)模型特点 本模型通过动脉内直接注射月桂酸造模,因此模型的成功率较高,方法简单,重复性和稳定性都很好,试剂价廉易得,尤其是通过这种多部位、半定量的统计学检查,提高了实验数据的科学性,结果可靠。
(3)比较医学 本模型与采用ZT医用胶造模方法相比,造模后术区感染率低,切口延期愈合率低,避免了ZT胶这种异体抗原本身的刺激反应及其所引起的各种异体抗原炎性反应直接造成的对股动脉的压迫。此模型复制的动物,符合人体TAO病理状态下的血管闭塞机理,其症状、体征及病理组织学改变与临床TA0患者的改变基本吻合。